實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則

1. 迷宮結(jié)構(gòu)標(biāo)準(zhǔn)
• 迷宮由兩條開(kāi)放臂（30 cm × 5 cm）和兩條封閉臂（30 cm × 5 cm × 15 cm）組成，十字交叉中心區(qū)為5 cm × 5 cm。

• 開(kāi)放臂邊緣設(shè)置0.5 cm高凸起以防止小鼠跌落，封閉臂頂部透明亞克力板覆蓋。
• 迷宮整體離地高度50 cm，臂間夾角90°，材質(zhì)為黑色磨砂PVC以消除反光干擾。
  

實(shí)驗(yàn)操作流程

1. 動(dòng)物適應(yīng)階段

• 選用8-12周齡SPF級(jí)C57BL/6J雄鼠（體重20-25 g），實(shí)驗(yàn)前7天單籠飼養(yǎng)。
• 實(shí)驗(yàn)前3天每日進(jìn)行30 min環(huán)境適應(yīng)（僅開(kāi)放迷宮中心區(qū)），適應(yīng)期光照強(qiáng)度15 lux。
• 實(shí)驗(yàn)前24 h禁食不禁水，實(shí)驗(yàn)前1 h轉(zhuǎn)移至行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室（保持黑暗環(huán)境）。

2. 正式實(shí)驗(yàn)步驟

• 定位階段：將小鼠面朝封閉臂置于中心區(qū)，記錄5 min內(nèi)行為軌跡。
• 數(shù)據(jù)采集：
• 開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)（四足全部進(jìn)入臂區(qū)）
• 開(kāi)放臂停留時(shí)間占比（總時(shí)間≥5 s為有效記錄）
• 頭部探出次數(shù)（軀干未進(jìn)入開(kāi)放臂但前肢伸出≥2 cm）
• 排便粒數(shù)（作為焦慮指數(shù)輔助指標(biāo)）
• 倫理要求：?jiǎn)沃恍∈髮?shí)驗(yàn)間隔≥10 min，使用75%乙醇擦拭迷宮去除氣味干擾。

數(shù)據(jù)分析規(guī)范

大鼠/小鼠高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)，XR-XG201，上海欣軟

1. 核心指標(biāo)閾值
• 焦慮樣行為判定：開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)<3次/5 min或停留時(shí)間<15%
• 運(yùn)動(dòng)活性指標(biāo)：總活動(dòng)距離>10 m提示藥wu/基因干預(yù)可能影響運(yùn)動(dòng)功能
• 探索行為閾值：頭部探出次數(shù)>8次/5 min提示環(huán)境新奇性偏好
2. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
• 采用雙因素重復(fù)測(cè)量方差分析（Group × Time），顯著性水平設(shè)為p<0.05。
• 效應(yīng)量計(jì)算：Cohen's d>0.8視為具有臨床意義差異。
• 異常值剔除：采用Grubbs檢驗(yàn)（α=0.05）處理離群數(shù)據(jù)點(diǎn)。

質(zhì)量控制要點(diǎn)

1. 時(shí)間窗控制：每日實(shí)驗(yàn)時(shí)段固定（9:00-12:00或14:00-17:00），避免小鼠生物鐘波動(dòng)。
2. 操作一致性：實(shí)驗(yàn)者與小鼠距離保持>1 m，避免視覺(jué)/聽(tīng)覺(jué)接觸。
3. 設(shè)備校準(zhǔn)：每周使用激光測(cè)距儀驗(yàn)證迷宮尺寸誤差<0.2 mm，光照度計(jì)校準(zhǔn)誤差<±2 lux。
4. 數(shù)據(jù)盲法：采用視頻追蹤系統(tǒng)（如Supermaze、Visutrack等動(dòng)物行為學(xué)分析軟件）自動(dòng)分析，人工復(fù)核比例≤20%。

特殊情形處理

• 凍結(jié)行為：連續(xù)30 s無(wú)移動(dòng)需終止實(shí)驗(yàn)并記錄為"行為僵直"。
• 墜落事件：發(fā)生跌落立即中止實(shí)驗(yàn)，該數(shù)據(jù)納入"意外終止組"單獨(dú)分析。
• 設(shè)備故障：實(shí)驗(yàn)中斷超過(guò)2 min需重新適應(yīng)環(huán)境30 min后重測(cè)。

行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法根據(jù)實(shí)驗(yàn)人員需求調(diào)整設(shè)計(jì)，上述方案僅做參考。

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