抑郁癥是普遍的神經(jīng)精神病疾之一，全球患病率超過4.5%，其特征是持續(xù)情緒低落、興趣減退、食欲、睡眠和認(rèn)知功能受損。目前可用的抗抑郁藥通常是有效的，但一些副作用，包括昏迷、癲癇發(fā)作和心臟毒性，限制了它們的廣泛分布。此外，近一半的抑郁癥患者未能獲得持續(xù)緩解，約三分之一的患者對任何干預(yù)措施均無反應(yīng)。

2023年11月10日，中國藥科大學(xué)汪豪課題組在 British Journal of Pharmacology 發(fā)表研究論文，題目為《Kaempferol-3-O-sophoroside contributes to modulation of depressive-like behavior in C57BL/6J mice by activating AMPK》。研究表明，PCS-1與AMPK結(jié)合，促進(jìn)BDNF的產(chǎn)生和自噬的增強(qiáng)，結(jié)果達(dá)到抗抑郁作用。本研究為藏紅花花瓣的臨床應(yīng)用提供了支持，并為AMPK作為抗抑郁的潛在靶點(diǎn)提供了進(jìn)一步的證據(jù)。

700 μM CORT可顯著降低PC12細(xì)胞活力，降低至50%左右。然而，PCS-1 treatment的劑量依賴性地改善了細(xì)胞損傷。雙染色顯示，PCS-1有效抑制了CORT誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞凋亡。Western blot分析顯示，與CORT處理相比，PCS-1處理后Bcl-2/Bax的比例增加，caspase-3和caspase-9的活性降低。此外，PCS-1還降低了ROS水平和MDA含量，增加了SOD活性。這些結(jié)果初步提示PCS-1在體外可能具有抗抑郁樣的特性。

本研究采用CORT誘導(dǎo)的抑郁小鼠模型和CUMS模型，通過多種行為測試來評價PCS-1在體內(nèi)的抗抑郁樣活性。皮質(zhì)酮暴露的小鼠的體重增加明顯少于對照組，但PCS-1 treatment改善了皮質(zhì)酮引起的體重減輕，尤其是在高劑量組，其表現(xiàn)優(yōu)于FLU組。CORT處理小鼠SPT的蔗糖偏好降低，TST和FST的靜止時間增加，PCS-1（10和20 mg/kg）或Flu treatment減輕了CORT暴露小鼠的抑郁樣行為。PCS-1（10和20 mg/kg）或Flu treatment顯著改善了皮質(zhì)酮誘導(dǎo)的運(yùn)動活動的減少。此外，CORT treatment小鼠的海馬體積也小于對照組小鼠。經(jīng)Flu或PCS-1 treatment后，海馬體積明顯增加。這些結(jié)果表明，PCS-1改善了抑郁樣行為，并可能與抑制海馬萎縮有關(guān)。

• 蔗糖偏好實(shí)驗(yàn)（sucrose preference test，SPT）

在SPT之前，所有小鼠都被單獨(dú)飼養(yǎng)，并在1%的蔗糖溶液中放置24小時。然后，在缺水12小時后，給每只小鼠提供兩個裝有1%蔗糖溶液和自來水的預(yù)稱重瓶。6小時后隨機(jī)并相互交換兩瓶酒的位置，以避免空間偏好。12小時后測量并記錄蔗糖溶液和水的攝入量。蔗糖偏好（SP）值計算如下：SP（%）=蔗糖攝入量(g)/[蔗糖攝入量(g) +水?dāng)z入量(g)]×100%。

• 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)（forced swim test，F(xiàn)ST）

每只小鼠分別暴露在一個透明圓柱體（20厘米直徑20厘米），其中包含大約20厘米的水（22°C-25°C）中訓(xùn)練15 min。24小時后再次將其放入氣缸中，游泳6 min，取其中4次min記錄靜止時間。

• 懸尾實(shí)驗(yàn)（tail suspension test，TST）

每只老鼠都被單獨(dú)暴露在一個訓(xùn)練期間，以避免實(shí)驗(yàn)期間的干擾。將小鼠放置在地板上方20厘米處，倒掛6 min,適應(yīng)2 min后，在接下來的4個min中測量靜止時間作為絕望的指標(biāo)。

評價CORT誘導(dǎo)小鼠海馬中的氧化指標(biāo)，進(jìn)一步評價過度氧化應(yīng)激在抑郁癥發(fā)病機(jī)制中的作用。結(jié)果顯示，與模型小鼠相比，PCS-1處理降低了ROS和MDA水平，提高了SOD活性。此外，PCS-1改善了CORT誘導(dǎo)的海馬中Bcl-2/Bax比值的降低，并增加了海馬中caspase-3和caspase-9的表達(dá)。這些結(jié)果提示，PCS-1可能通過抑制氧化和凋亡系統(tǒng)，對CORT誘導(dǎo)的海馬損傷發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。

采用ELISA法檢測CORT處理后的PC12細(xì)胞中BDNF的水平。與CORT處理組相比，F(xiàn)lu或PCS-1顯著提高了BDNF的水平，細(xì)胞immunity熒光實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了這一點(diǎn)。Western blot結(jié)果顯示，CORT降低了PC12細(xì)胞中BDNF、p-TrkB和p-AKT的表達(dá)水平，然后PCS-1逆轉(zhuǎn)了這些表達(dá)水平。PCS- 1處理有效地保護(hù)了Neuro-2a細(xì)胞免受CORT誘導(dǎo)的損傷，導(dǎo)致神經(jīng)突的形成和延伸以劑量依賴的方式增強(qiáng)。此外，PCS-1單獨(dú)對Neuro-2a細(xì)胞具有增殖作用，促進(jìn)神經(jīng)突的形成和延伸，特別是在濃度為100 μM時。immunity熒光檢測顯示，與對照組相比，pcs-1處理的初級海馬神經(jīng)元中MAP2（樹突指標(biāo)）和Tau（軸突指標(biāo)）的表達(dá)水平顯著升高。同時，PCS-1的使用增加了初級海馬神經(jīng)元的突起長度和分支數(shù)量。這些結(jié)果表明，PCS-1可以上調(diào)BDNF的表達(dá)，從而促進(jìn)神經(jīng)元分化和神經(jīng)突起延伸。

綜上所述，藏紅花花瓣的主要活性物質(zhì)PCS-1顯著改善了CORT和CUMS小鼠模型的抑郁樣行為，促進(jìn)了海馬BDNF的產(chǎn)生，減弱了CORT誘導(dǎo)的海馬萎縮，誘導(dǎo)自噬減少了NLRP3神經(jīng)炎癥。結(jié)果表明，PCS-1是一種潛在的AMPK激活因子，通過與AMPK結(jié)合，促進(jìn)BDNF的表達(dá)和誘導(dǎo)自噬。本研究初步闡明了藏紅花花瓣的藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)和抗抑郁機(jī)制。此外，結(jié)果進(jìn)一步證明AMPK激活介導(dǎo)的BDNF增加和自噬增強(qiáng)可以改善小鼠抑郁癥狀。

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