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淺談動物行為實(shí)驗(yàn)研究中不可忽視的盲實(shí)驗(yàn)法

摘要:被廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、藥理學(xué)和心理學(xué)等學(xué)科中的盲實(shí)驗(yàn)法,是一種為避免由于人為主觀性而對實(shí)驗(yàn)觀測結(jié)果產(chǎn)生偏差的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法。然而,該方法在動物行為研究領(lǐng)域一直不被重視。近年來有學(xué)者逐漸意識到這個問題,并通過文獻(xiàn)綜述和分析,發(fā)現(xiàn)大部分需要采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究均忽略了此設(shè)計(jì)方法,使得其研究結(jié)果的效應(yīng)量明顯高于采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究,說明實(shí)驗(yàn)中觀測者的主觀偏見對研究結(jié)果造成了影響。本文通過對盲實(shí)驗(yàn)法的介紹,強(qiáng)調(diào)了其在動物行為研究中的重要性,并對其在該研究領(lǐng)域中的應(yīng)用進(jìn)行了闡述和建議。


在科學(xué)實(shí)驗(yàn)中,如何排除人為干擾和人為主觀性對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響是非常重要的,一旦實(shí)驗(yàn)結(jié)果包含這些不利因素所引起的效應(yīng),其可靠性將大打折扣,甚至?xí)贸鐾耆嚆:湾e誤的結(jié)論。因此,除了實(shí)驗(yàn)組,對照組被普遍應(yīng)用于科學(xué)研究中,以排除人為干擾或其他變量的影響(Johnson et al. 2002)。盲實(shí)驗(yàn)法(blinded methods)是一種為了避免由于人為主觀性而對實(shí)驗(yàn)觀測結(jié)果產(chǎn)生偏差的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法(Holman et al. 2015)。該實(shí)驗(yàn)法被普遍應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)、藥理學(xué)、心理學(xué)等學(xué)科,具有舉足輕重的地位,然而,在動物行為學(xué)研究領(lǐng)域,

該方法卻被過度忽視(Tuyttens et al. 2014)。近年來有學(xué)者逐漸意識到這種現(xiàn)象,并通過對動物行為研究相關(guān)文獻(xiàn)的綜合分析,揭示了盲實(shí)驗(yàn)法的缺失對動物行為研究所帶來的負(fù)面影響(van Wilgenburg et al. 2013,Kardish et al. 2015),這種缺失勢必影響動物行為研究文獻(xiàn)的可靠性,甚至?xí)`導(dǎo)讀者進(jìn)而影響今后的研究。本文對盲實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行了介紹,并對其在動物行為研究領(lǐng)域中的應(yīng)用進(jìn)行了闡述和建議,強(qiáng)調(diào)其在該領(lǐng)域研究中的重要性和必要性。


1、盲實(shí)驗(yàn)法的產(chǎn)生


所謂“盲”,即在實(shí)驗(yàn)中排除操作者和參與者有意識或下意識的個人主觀性和偏愛。盲實(shí)驗(yàn)法z初的雛形在 19 世紀(jì)晚期由法國生理學(xué)家 Claude Bernard 提出,他建議所有的科學(xué)實(shí)驗(yàn)都應(yīng)該將構(gòu)思設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的人和執(zhí)行實(shí)驗(yàn)的人分開,前者是熟悉相關(guān)研究領(lǐng)域的學(xué)者,而后者則是沒有接受過任何訓(xùn)練,對相關(guān)理論和假說不知情的人。而這與當(dāng)時的啟蒙運(yùn)動觀點(diǎn)大相徑庭,后者認(rèn)為只有接受過良好教育、見多識廣的科學(xué)家,才能對科學(xué)研究作出客觀有效的觀測(Daston 2005)。


2、盲實(shí)驗(yàn)法的類型


盲實(shí)驗(yàn)法可以分為單盲法(single-blind trials)、雙盲法(double-blind trials)和三盲法

(triple-blind trials)。


單盲法指在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中,研究對象對于自己是否處于實(shí)驗(yàn)中毫不知情,而實(shí)驗(yàn)觀測者在實(shí)驗(yàn)前便清楚不同研究對象所在的分組等各種實(shí)驗(yàn)信息,即只有一方對信息是“盲”的(Tuyttens et al. 2014)。這種信息不對稱,有利于實(shí)驗(yàn)觀測者實(shí)時掌握情況,和避免研究對象由于安慰劑效應(yīng)(placebo effect)對結(jié)果造成的影響(Holmes 2008)。比如評價某新藥在zhi療某種ji病的療效時,需要建立控制組,對控制組中的病人僅給予無療效的藥劑作對照,但如果該組的病人知道自己服用了某種藥wu,其情緒、心理和神經(jīng)行為上的變化會影響自身的身體健康狀況,形成安慰劑效應(yīng),使實(shí)驗(yàn)結(jié)果有偏差。單盲實(shí)驗(yàn)的前提是觀測者雖然掌握了實(shí)驗(yàn)的所有信息,但不會像研究對象那樣對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。然而,實(shí)驗(yàn)觀測者在一些情況下也會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成偏差,如上面的例子中,觀測者知道每個病人所處的分組,即清楚每個病人所服用的是新藥還是安慰劑,其對服用新藥組的心理預(yù)期,即預(yù)期服用藥wu的人會比控制組中的人康復(fù)快,可能會使其在評估藥效和記錄病人變化時形成下意識的偏倚。為了避免這種偏差,很必要使用雙盲法。


雙盲法指實(shí)驗(yàn)除了研究對象對實(shí)驗(yàn)信息不知情,觀測者也不知道研究對象所在的分組(即

實(shí)驗(yàn)組還是控制組)(Rivers et al. 1907)。只有在實(shí)驗(yàn)結(jié)束,數(shù)據(jù)記錄也完成以后,觀測者才知道結(jié)果,這有利于排除觀測者在實(shí)驗(yàn)操作和記錄中無意識的主觀偏差和個人偏好所帶來的影響,是一種更加嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法。在雙盲法中,實(shí)驗(yàn)構(gòu)思和設(shè)計(jì)可能由觀測者來完成,

但實(shí)驗(yàn)信息往往需要交由第三方來進(jìn)行處理,在實(shí)驗(yàn)前不可告知觀測者,或者構(gòu)思和設(shè)計(jì)實(shí)

驗(yàn)的人同時掌握實(shí)驗(yàn)信息,但讓不知情的人成為觀測者來執(zhí)行實(shí)驗(yàn)和記錄數(shù)據(jù)。在動物行為 研究中,需要應(yīng)用雙盲法的情況一般是通過人為主觀對某種變量進(jìn)行量化的實(shí)驗(yàn)方法。如對

動物的某種行為進(jìn)行觀察和主觀量化(楊曉軍1996)、對動物棲息地的某種特征進(jìn)行主觀量化(徐霄等 2012)、對動物某種特征之間的相似性進(jìn)行主觀量化(Stevens et al. 2009)。這些方面的研究如果沒有采用雙盲法,在實(shí)驗(yàn)中很容易由于觀測人的主觀預(yù)期而使數(shù)據(jù)產(chǎn)生偏差,如動物巢址選擇方面的研究,對于巢隱蔽性的量化往往通過觀測者進(jìn)行主觀估測,由于有經(jīng)驗(yàn)的觀測者受“隱蔽性高的巢被捕食的風(fēng)險(xiǎn)應(yīng)該較小”這種心理預(yù)期的影響,在對完整巢和被捕食巢進(jìn)行隱蔽性估測的時候,就可能下意識地高估完整巢或低估被捕食巢的隱蔽性。要避免這種主觀偏倚,可以通過對實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟恢榈牡谌綄ψ兞刻卣鬟M(jìn)行估測,或者通過更加客觀的方法對變量特征進(jìn)行量化。


三盲法是對雙盲法的拓展,指實(shí)驗(yàn)觀測者、研究對象和數(shù)據(jù)分析者三方均不清楚實(shí)驗(yàn)的信 息,只有當(dāng)分析結(jié)果出來后才知曉(Friedman etal. 2010)。這種方法理論上從各方面降低了參與實(shí)驗(yàn)各方的主觀性帶來的偏差,但同時也降低了研究者對整個實(shí)驗(yàn)全局的了解,其執(zhí)行難度也較大,所以在科學(xué)研究中的應(yīng)用也較少(Andrade et al. 2009)。


3、忽視盲實(shí)驗(yàn)法對動物行為研究的影響


近年來有若干學(xué)者逐漸意識到在動物行為研究中,盲實(shí)驗(yàn)法的缺失對某些相關(guān)領(lǐng)域的負(fù)面影響,并通過對動物行為研究中的重要文獻(xiàn)進(jìn)行綜合分析對此提供證據(jù)。van Wilgenburg等(2013)對蟻類親緣識別行為的研究進(jìn)行綜述和分析,發(fā)現(xiàn)觀測者在觀察和評估巢內(nèi)或巢間螞蟻之間的侵害行為時,很容易受到其專業(yè)知識背景的影響,即相信巢內(nèi)螞蟻之間的侵害行為低于巢間,結(jié)果未采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究所報(bào)道,巢內(nèi)侵害行為明顯低于采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究。


接著 Kardish 等(2015)對行為、生態(tài)和進(jìn)化研究領(lǐng)域的 492 篇文獻(xiàn)進(jìn)行綜述,發(fā)現(xiàn)

其中 248 篇文獻(xiàn)的研究實(shí)驗(yàn)屬于具有觀測者主觀影響風(fēng)險(xiǎn)的內(nèi)容,但卻只有 13.3%的文獻(xiàn)使用了盲實(shí)驗(yàn)法。Holman 等(2015)通過對生命科學(xué)研究領(lǐng)域4 511個期刊的870 962篇文獻(xiàn)進(jìn)行綜述和綜合分析后,發(fā)現(xiàn)沒有采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究所報(bào)道的效應(yīng)量(effect size)明顯高于采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究,效應(yīng)量是衡量處理效應(yīng)大小的指標(biāo),在不同研究之間可以進(jìn)行比較,未采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究呈現(xiàn)較高的效應(yīng)量,表明其研究結(jié)果相對于采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究具有較高的偏差。另外,未采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究結(jié)果所獲得的值顯著性也高于采用盲實(shí)驗(yàn)法的研究。


比利時根特大學(xué) Tuyttens 等(2014利用研究來證明盲實(shí)驗(yàn)法的缺失是如何影響觀測者的主觀評價的,首先他們向在校 157 名行為   領(lǐng)   學(xué)  進(jìn)     Sus scrofadomesticus)互動行為意義的教育,告知學(xué)生家豬的互動行為可分為積極和消極兩種,積極互動行為包括玩耍、嗅探和碰鼻,消極互動行為包括撞頭、咬耳朵、咬尾巴或其他身體部位,而高度群居的成長環(huán)境有利于塑造家豬的積極互動行為。接著將學(xué)生分成兩組( b),讓他們觀看 5 min 家豬互動行為的視頻,并評估和記錄積極與消極互動行為的次數(shù),組的每位學(xué)生觀看 段視頻,并提前告知其中第 段視頻為控制組,而第 段視頻為實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組中的家豬都是在高度群居的環(huán)境中養(yǎng)大的。而實(shí)際上 段視頻均屬于同一個視頻,但通過一些處理使學(xué)生認(rèn)為是不同視頻,第 個視頻是第 個視頻的鏡像(即視頻中動物的移動方向相反),視頻亮度也進(jìn)行了調(diào)整,并且視頻中顯示的記錄日期和時間等也各不相同。組的每位學(xué)生同樣觀看這 2段視頻,但視頻的順序顛倒,即被告知第 段視頻是實(shí)驗(yàn)組,而第 段視頻是控制組。結(jié)果表明,家豬行為的觀測結(jié)果明顯受到學(xué)生主觀偏見的影響,組和 組學(xué)生所記錄的實(shí)驗(yàn)組家豬積極互動頻次均顯著高于控制組,而消極互動頻次則低于控制組,但其實(shí)兩個視頻中的家豬行為并沒有差異。


4、總結(jié)與建議


綜上所述,未使用盲實(shí)驗(yàn)法hui使一些動物行為研究結(jié)果產(chǎn)生偏差。然而,并不是所有的動物行為研究都需要使用盲實(shí)驗(yàn)法。研究動物行為時,有些行為觀測需要研究者對其進(jìn)行主觀定義和量化,當(dāng)動物行為迅速而不容易觀察、動物行為和特征的定義模棱兩可且行為和特征難以量化的情況下,如未采用盲實(shí)驗(yàn)法所面臨的偏差風(fēng)險(xiǎn)就很大,尤其當(dāng)研究人員對某處理組具有很高的心理期待時。以上的文獻(xiàn)綜述和分析,便是針對這種類型的觀測數(shù)據(jù),而其中所提到的盲實(shí)驗(yàn)法,實(shí)際上是雙盲法,因?yàn)閯游镄袨檠芯恐校瑒游镒鳛檠芯繉ο?,并不能理解觀測者的研究意圖,所以動物行為研究中所稱的盲實(shí)驗(yàn)法,是避免觀測者主觀偏見對研究結(jié)果造成影響的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)法。當(dāng)然,雖然作為研究對象的動物對實(shí)驗(yàn)信息是盲的,但觀測者仍需對研究對象進(jìn)行隨機(jī)分組,并盡量避免動物的背景因素(如年齡、大小、性別等)和環(huán)境因素(如溫度、海拔等)對研究結(jié)果的影響。


對于盲實(shí)驗(yàn)法在動物行為研究中的應(yīng)用,建議:

(1)研究者在構(gòu)思和設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時應(yīng)充分考慮到其研究類型具有主觀觀測偏差的風(fēng)險(xiǎn),是否需要和是否能夠使用盲實(shí)驗(yàn)法;

(2)研究者應(yīng)盡量避免以人為主觀的角度對動物的行為和特征進(jìn)行定義和量化,盡量使用儀器和相關(guān)技術(shù)來進(jìn)行客觀地定量化;

(3)在論文的研究方法中說明實(shí)驗(yàn)是否使用盲實(shí)驗(yàn)法,如未使用是基于什么緣由,這一點(diǎn)德國的學(xué)術(shù)期刊Behavioral Ecology and Sociobiology 在 2015 年 9 月已發(fā)文要求之后的投稿文章均需要注明是否使用盲實(shí)驗(yàn)法(Traniello et al. 2015);

(4) 除了研究人員,學(xué)術(shù)期刊的編輯和審稿人也應(yīng)在審稿過程中對文章采用盲實(shí)驗(yàn)的必要性和情 況進(jìn)行監(jiān)督,當(dāng)然,由于不是所有的研究都需要或能夠使用盲實(shí)驗(yàn)法,所以,是否采用盲實(shí) 驗(yàn)法不應(yīng)成為評價文章水平高低的門檻。有些動物行為特征有明顯區(qū)分且不受觀測者心理預(yù) 期的影響,所以不需要采用雙盲法。


換句話說,只有受觀測者主觀性和心理預(yù)期影響的變量估測,才需要采用雙盲法,特別是對于沒有明顯區(qū)分界限甚至模棱兩可的行為特征。這是觀測者和審稿人需要特別留意的。從事動物行為研究的人員在國內(nèi)越來越多,中國動物學(xué)會動物行為學(xué)專業(yè)委員會也于2015 年 10 月在北京正式成立,這些建議符合目前國際學(xué)術(shù)界和動物行為學(xué)研究的呼吁和需求,有利于促進(jìn)研究人員在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中采用更加科學(xué)和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃悸泛头椒?,也可降低學(xué)術(shù)文章中主觀性偏見對研究結(jié)果的影響,從而提高其可靠性和可比較性。


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